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时间:2022-11-24 18:07 阅读数:4659人阅读

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艾滋病的检测胡芳琴副主任医师绍兴市老年医院[患者问]: 艾滋病检测分为初筛复检确认三个步骤.请问确认是什么?就是抽血,然后再进行一次艾滋病抗体检测吗?医生答]: 总体来说可以分为抗体检测和病毒检测两大类.病毒检测包括细胞培养(病毒分离),p24抗原检测和病毒核酸检测.早期对HIV的诊断主要是通过血清学试验检测抗HIV的抗体,间接地诊断HIV感染.近几年,分子生物学方法不断被应用到HIV的检测中,HIV的实验室诊断方法取得了很大的进展,核酸检测已经成为了HIV实验室诊断的发展方向,抗体通常是在感染后3~8周能够被检测出来.目前,大多应用双抗原夹心法,这种方法具有很好的灵敏性和特异性.抗体检测由初筛和确认试验组成,初筛试验呈阳性的必须进行确认试验.酶联免疫吸附分析(ELISA)方法有一定的灵敏度,且操作简单,快速,适合对大量样品的检测.因此,是目前临床通用的初筛检测方法.国际上有3种确认试验方法,包括免疫印迹试验,条带免疫试验及免疫荧光试验,目前以免疫印迹试验最为常用,在窗口期,病毒抗体不能被检出,但可以检测到病毒相关抗原或分离病毒.抗原能够在个体感染后先于血清转化2~18d被检测到.因此,在血清转化期通过检测p24抗原有着很大的优势,可以作为早期辅助诊断HIV感染的一种方法,病毒培养是检测HIV感染最精确的方法.一般采取培养外周血单个核细胞(PBMC)的方法进行HIV的诊断,病毒核酸检测通常是通过检测HIVRNA水平来反映病毒载量,具有很高的灵敏度,使用适时荧光聚合酶链反应(PCR)技术,能够在HIV感染的前2周检测到病毒核酸.病毒核酸检测方法可用于HIV的早期诊断,如窗口期辅助诊断,病程监控,指导治疗方案及疗效测定,预测疾病进程等.目前常用的测定方法有逆转录PCR实验(RT?PCR),核酸序列扩增实验(NASBA),分支DNA杂交实验(bDNA)等.使用高灵敏度的适时荧光PCR技术,能够在HIV感染的前2周检测到病毒核酸.hiv核酸检测有什么用?林潮双主任医师中山大学附属第三医院HIV核酸检测主要是为了判断机体内是否存在艾滋病毒核酸,从而最终确诊机体是否存在艾滋病毒的感染。这种检查方式主要适用于窗口期内人群,对于已经过了窗口期的患者也可以使用此方法检查,但是做艾滋病抗体检查相对比较快一些。

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艾滋病检测徐霞主管护师[患者问]: 艾滋病分为两型:HIV-1型和HIV-2型,它们又有各自的亚型.不同地区流行的亚型不同,同一亚型在抗体检测试剂在一个地区能检测出,但是,在别的地方就检测不出来了?医生答]: 抗体检测主要有酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫荧光试验(IFA)ELISA用去污剂裂解HIV或感染细胞液提取物作抗原,IFA用感染细胞涂片作抗原进行抗体检测,如果发现阳性标本应重复一次.为防止假阳性,可做Westernblot(WB,蛋白印迹法)进一步确证.WB法是用聚丙烯酰胺凝胶电泳将HIV蛋白进行分离,再经传移电泳将不同蛋白条带转移于硝酸纤维膜上,加入病人血清孵育后,用抗人球蛋白酶标抗体染色,就能测出针对不同结构蛋白抗体,如抗gp120,gp41,P24抗体,特异性较高.快速检测法,也称为金标法,也是抗体检测的一种方法,根据免疫层析法的原理,用于HIV抗体检测的定性检测.(二)抗原检测用ELISA检测P24抗原,在HIV感染早期尚未出现抗体时,血中就有该抗原存在.由于P24量太少,阳性率通常较低.现有用解离免疫复合物法或浓缩P24抗原,来提高敏感性.(三)核酸检测用PCR法检测HIV基因,具有快速,高效,敏感和特异等优点,目前该法已被应用于HIV感染早期诊断及艾滋病的研究中.(四)病毒分离常用方法为共培养法,即用正常人外周血液分离单个核细胞,加PHA刺激并培养后,加入病人单个核细胞诊断及艾滋病的研究中.指导意见:1HIV的感染机制及感染标志HIV病毒侵入人体后,其表面糖蛋白gp120与细胞表面受体蛋白CD4以高亲和力结合,吸附到宿主细胞上;gp120再与宿主细胞表面辅助受体相互作用,使病毒与宿主细胞膜更接近;gp41产生一系列构象变化,其N端的融合肽片段插入宿主细胞膜,导致病毒包膜与细胞膜的最终融合,病毒RNA进入细胞.在HIV感染后,最先能够监测到病毒RNA,然后是p24抗原,最后是抗体[2].在感染后的10~14d内,病毒RNA水平是呈指数上升,随后下降并保持在持续稳定的水平上,进入HIV无症状期[3].p24抗原水平随着病毒RNA水平的发展而发展,在急性感染期就可以出现,被认为是病毒复制的间接标志,但由于检测方法的灵敏度不够而使得其检出时间要比RNA晚.从HIV感染到能够检测出HIV抗体这一时期,被称作“窗口期”.在窗口期,能够通过病毒RNA,p24抗原和CD4淋巴细胞水平来确定HIV感染.CD4淋巴细胞水平随着感染的发展而逐渐下降,当其在血液中细胞下降到200个/mL时,就会发生[1]严重的免疫缺陷,患者就被确诊为艾滋病.病毒RNA,p24抗原,HIV抗体和CD4淋巴细胞水平可以用来确定HIV感染,检测病情发展[4].HIV在病毒分类中属逆转录病毒科慢病毒属中的人类免疫缺陷病毒组.迄今为止,根据血清学反应和病毒核酸序列测定,全球流行的HIV可分为2型:HIV?1型和HIV?2型[5].在HIV?1型内,根据编码包膜蛋白的env基因和编码壳蛋白的gag基因序列的同源性又进一步分为3个组:M组(主要组)O组(外围组)和N组(新组或非M非O组)M组内又可分为A?J10个亚型.在HIV?1型和HIV?2型之间,其核苷酸序列有45%的同源性,并且存在免疫交叉反应.应用免疫印迹法(Westblot)可以将二者明确地区别开来[6].2HIV感染的主要检测方法目前检测HIV的方法有100多种[7],总体来说可以分为抗体检测和病毒检测两大类.病毒检测包括细胞培养(病毒分离),p24抗原检测和病毒核酸检测.早期对HIV的诊断主要是通过血清学试验检测抗HIV的抗体,间接地诊断HIV感染.近几年,分子生物学方法不断被应用到HIV的检测中,HIV的实验室诊断方法取得了很大的进展,核酸检测已经成为了HIV实验室诊断的发展方向[8].抗体通常是在感染后3~8周能够被检测出来[9].目前,大多应用双抗原夹心法,这种方法具有很好的灵敏性和特异性.抗体检测由初筛和确认试验组成,初筛试验呈阳性的必须进行确认试验.酶联免疫吸附分析(ELISA)方法有一定的灵敏度,且操作简单,快速,适合对大量样品的检测.因此,是目前临床通用的初筛检测方法.国际上有3种确认试验方法[10],包括免疫印迹试验,条带免疫试验及免疫荧光试验,目前以免疫印迹试验最为常用.在窗口期,病毒抗体不能被检出,但可以检测到病毒相关抗原或分离病毒.抗原能够在个体感染后先于血清转化2~18d被检测到.因此,在血清转化期通过检测p24抗原有着很大的优势,可以作为早期辅助诊断HIV感染的一种方法[11].病毒培养是检测HIV感染最精确的方法.一般采取培养外周血单个核细胞(PBMC)的方法进行HIV的诊断[12].病毒核酸检测通常是通过检测HIVRNA水平来反映病毒载量,具有很高的灵敏度,使用适时荧光聚合酶链反应(PCR)技术,能够在HIV感染的前2周检测到病毒核酸.病毒核酸检测方法可用于HIV的早期诊断,如窗口期辅助诊断,病程监控,指导治疗方案及疗效测定,预测疾病进程等.目前常用的测定方法有逆转录PCR实验(RT?PCR),核酸序列扩增实验(NASBA),分支DNA杂交实验(bDNA)等.使用高灵敏度的适时荧光PCR技术,能够在HIV感染的前2周检测到病毒核酸[13,14].2.1HIV抗体,抗原检测HIV抗体一般在人感染后几周逐渐出现,可延续至终生[15],血清学试验分为初筛和确认试验.最常用的初筛试验和确认试验分别是酶联免疫吸附试验和免疫印迹试验(WB).常规实验方法:酶联免疫吸附试验,免疫印迹试验(WestBlot),间接免疫荧光法(IFA).快速检测方法:明胶颗粒凝集试验,斑点免疫结合试验,P24抗原的检测,分子生物学方法,RT?PCR检测法,荧光实时PCR检测技术,支链DNA(bDNA)连接酶酶促链式反应(LCR),核酸序列依赖性扩增(NASBA),转录介导的扩增(TMA)2.1.1酶联免疫吸附试验ELISA法的基本原理是免疫反应物通过化学或免疫学的方法形成酶结合物,酶结合物能与待检样品中相应的抗原或抗体结合成为免疫复合物,然后加入酶底物,经酶的催化或水解作用,无色底物产生颜色,用肉眼,分光光度计观察结果.初筛用的HIVELISA试剂目前已经发展到第四代检测试剂.第一代试剂主要以病毒裂解物或部分纯化的病毒抗原包被反应板,以检测血清中的抗体.由于包被的抗原不很纯,假阳性率较高.第二代试剂使用基因工程方法得到的重组抗原和合成肽包被反应板,由于纯化抗原的使用,特异性有了很大提高.第三代试剂使用双抗原夹心法检测抗体,进一步提高了敏感性.第四代试剂则在第三代的基础上进一步增加了P24抗原的检测,把HIV抗原和抗P24的抗体同时包被反应板,可同时检测血清中的HIV抗体和P24抗原.2.1.2免疫印迹试验免疫印迹试验主要用于确认试验,基本原理是HIV全病毒抗原经过SDS?PAGE电泳,将分子量大小不等的蛋白带分离开来,然后再把这些已经分离的不同蛋白带电转移到硝酸纤维素膜上.将此膜切割成条状,每一条硝酸纤维素膜上均含有经电泳分离过的HIV病毒抗原.将待检血清样品用稀释液稀释成1/100,再把它直接加到硝酸纤维素膜上,恒温震荡,使其充分接触反应,血清中若含有抗HIV抗体,就会与膜条上的抗原带相结合.加入抗人IgG酶结合物和底物后,即可使有反应的抗原?抗体结合带呈现紫褐色,根据出现条带情况判定结果.有报告说,免疫印迹试验的特异性不是很好,有大约2%的假阳性率,但免疫印迹试验依然是目前最常用的HIV确认试验.2.1.3免疫荧光试验(IFA)基本原理为应用H?9或HUT?78培养细胞作为载体,用HIV感染细胞,该细胞内就会含有HIV抗原,将HIV感染的淋巴细胞涂于玻片上,固定,制备为抗原片,加入待检血清,待检血清中的抗HIV抗体与抗原结合后,再与荧光素标记的抗人Ig结合,在荧光显微镜下可见到细胞内有黄绿色荧光.2.1.4明胶颗粒凝集试验(PA)PA的基本过程是先将样品稀释,然后分别加入经抗原致敏的和未致敏的明胶颗粒,混匀后保温(一般为室温).当血清中有HIV抗体存在时,经抗原致敏的明胶颗粒与抗体发生抗原抗体反应,根据明胶颗粒在孔中的凝集情况判读结果.PA操作简便,无需特殊仪器设备,适合对少量标本的检测.【标准答案】可用于HIV核酸检测的样品种类是?瑞文文摘A . 全血B . 唾液C . 尿液D . 滤纸干血斑。

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∩0∩ hiv核酸检测蒋卫民主任医师复旦大学附属华山医院HIV核酸检测的窗口期,目前已缩短到14-21天,因此,出现高危险行为后,如有相似症状应引起重视。窗口期也许不能检测到抗体,但并不代表没有感染病毒,通过核酸检测就能准确检测到。自1981年开始,人类认识到艾滋病后,艾滋病的阴云一直笼罩着人们的心头。随着检测手段的进步,艾滋病窗口也出现了明显的分割,如果生活中有些高危行为想要检测,肯定想要知道HIV核酸检测窗口期大约是多久?1、HIV核酸检测的窗口期是多长时间?艾滋病核酸检测的窗口期一般在14天至21天左右。现在窗口期已逐渐缩短,窗口期缩短,对于筛查艾滋病更重要,部分感染者,有可能出现与感冒相似的症状,其实是由于人体免疫系统发生急性损伤所致。多数患者的临床症状较轻,约持续1~3周后,可在一定程度上缓解,因此,发生高危性行为后,如有类似症状,建议还是要尽早做安全检查,不要马虎大意。2、什么是艾滋病窗口期?艾滋病毒进入人体后并不会立刻出现各种症状,所以将艾滋病毒直接侵入人体血液,产生足够量,可进行检测,这一时期称为窗期。窗期并不是完全安全的,虽然无法在体内检测到抗体,但由于艾滋病毒已经入侵,可以通过核酸检测来检测,另外感染者在窗口期也是有传染性的。其他人还搜了尽早治疗有哪些好处唾液可用于hiv核酸检测吗可用于hiv检测的样品下列哪些不是甲类传染病尽早治疗艾滋病有哪些好处艾滋病自我检测的好处有哪些。

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hiv核酸检测准确吗薛宏丽主任医师辽宁省人民医院HIV核酸检测基本准确,HIV核酸检测是借助于少量核酸序列,精确的定量的高灵敏度的检测技术,主要检测血浆或者是血清HIV-RNA水平,最常用的方法是RT-PCR法,检测每毫升血清或者血浆中HIV-RNA的拷贝数,并能可靠地检测出血浆或血清中低于40拷贝/毫升的HIV-RNA。一般来说HIV-RNA在40拷贝/毫升,使这种可信度比较大。这种技术也容易出现假阳性,因为HIV-RNA水平受免疫系统激活状态的影响很大,在二次感染或者是免疫激活时可能会有很大的波动,所以HIV核酸检测不是诊断艾滋病的金标准,只是辅助诊断的方法,对早期诊断意义较大,对抗病毒治疗效果的评估意义较大。hiv核酸检测准确吗李小燕副主任医师华润武钢总医院一般在高危行为后11天做HIV核酸检测,如果结果为阴性,则可以排除90%以上。因为HIV核酸检测主要是检测人体内HIV的具体病毒数,在感染后1周左右可以检测到,4周左右达到高峰,其检测结果有以下三种:1、病毒量>5000copies\/mL,则可确定感染;2、病毒载量比较低,此时需要进一步复查;3、没有检测到病毒,此时也不能完全排除,因为HIV的病毒有多种亚型,核酸检测不一定能够覆盖所有亚型,因此在临床上还需要联合抗体的检测来进一步确诊。艾滋病目前的确诊方法主要有三种,即抗体、抗原,以及核酸的办法。采取较多的还是检测抗体,一般12周抗体阴性则可完全排除,或者用艾滋病的四代试剂联合检测抗原抗体,一般4周阴性则可排除。

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国家认可核酸检测hiv吗殷彩梅主任医师辽宁省朝阳市中心医院国家认可核酸检测hiv。hiv核酸检测是艾滋病检测的重要检查项目之一,hiv核酸定量检测和cd4+t淋巴细胞计数是判断疾病进展、指导临床用药、评估疗效和预后的重要指标。特别是18个月内的婴幼儿,由于hiv感染母亲的hiv抗体可以通过胎盘进入胎儿体内,因此hiv感染诊断不能依靠抗体检测,需要应用病毒学检测方法来检测,常用的就是核酸检测,检测hivDNA或RNA确诊。另外,虽然hiv抗体检测是hiv感染的金标准,但在特殊情况下,通过核酸检测,诊断有无病原体感染,可将艾滋病病毒检测窗口期缩短。hiv核酸检测是什么意思?想进行核酸检测,HIV核酸检测是王晓彦主任医师首都医科大学附属北京天坛医院[患者问]: 之前有过不洁的性生活,也感染上尖锐湿疣,现在已经治愈了,想进行核酸检测,HIV核酸检测是什么意思?医生答]: HIV核酸检测是临床中的一种检测方式,主要是用于检测人体以及血液中是否存在HIV病毒的检查方式。如果之前接触过患有艾滋病的患者或出现不洁的性生活,是可以通过HIV核酸检测检查出来的,确诊以后在医生的指导下进行对症治疗,积极治疗以后可以防治并发症,治疗期间需要定期复查。

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